DETERMINACIÓN DE ENZIMAS DE FUNCIONAMIENTO HEPÁTICO: TGO Ó AST

Objetivo:

Conocer una de las principales enzimas intracelulares, que se encuentra en las células del corazón células del hígado y músculo  esquelético. 

Significado clínico:

La AST es una enzima intracelular, se encuentra en niveles altos en el músculo del corazón, las células del hígado, las células del músculo esquelético y en menores cantidades en otros tejidos.

Aun que un nivel elevado de AST en suero no es especifico de enfermedad hepática se emplea principal mente para su diagnostico y seguimiento, junto con otras enzimas como la la ALT y ALP. 

También se emplea en el control post-infarto, empecientes con desordenes en músculo esquelético y en otra afecciones.

Material:

• 1 Espectrofotometro o analizador para lecturas a 340nm
• Baño termostatable a 25°C, 30°C o 37°C (+ 0,1°C)
• cubetas de 1.0cm de paso de luz
• 1 Equipamiento habitual de laboratorio 
• 1 Centrifuga/ tubos de ensayo de 13x100mm

Procedimiento:

1. Condiciones del ensayo:

       Longitud de onda.............................................340nm

       Cubeta.......................................................1cm paso de luz

      Temperatura constante...............................25°C/30°C/37°C

2. Ajustar el espectrofotometro a 0 frente a agua destilada o aire.

3. Pipetear en una cubeta:

  RT (mL)            1.0

Muestra(µL)        100 

4. Mezclar, incubar un minuto.

5. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronometro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos

6. Calcular el promedio del incremento de la absorbancia por minuto (rA/min)

CÁLCULOS: rA/min x 1750 = U/L de AST.

IMPORTANTE: Esta practica es lo mismo que Determinación de enzimas de funcionamiento hepático TGP ó ALT. Lo único cambiante es el reactivo y es un equipo de transmitancias TGP para 25 pruebas.